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CCK8試劑盒日本同仁常見問題解答(二)
上篇文章，我們已經(jīng)介紹了一部分CCK8試劑盒日本同仁的常見問題，本文將繼續(xù)為大家講解。1、實驗之前，是否需要先檢測一下培養(yǎng)基和CCK-8是否會反應?建議使用一個孔作一下檢測，因為有培養(yǎng)基中可能含有氧化還原反應的物質(zhì)，在正式實驗之前有必要先確認培養(yǎng)基和CCK-8是否反應。一般正常在的OD值應該在0.4以下。2、如果加入的藥物中含有金屬，是否會有影響?金屬對CCK-8顯色有影響。當終濃度為1Mm的氯化亞鉛、氯化鐵、硫酸銅會抑制5%、15%、90%的顯色反應，使靈敏度降級。如果終濃...
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2015-03-02
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CCK8試劑盒日本同仁常見問題解答(一)
CCK8試劑盒日本同仁是常用的試劑盒之一，很多客戶在使用時都會有一些疑問，北京沃比森整理總結(jié)一些常見的問題，希望給大家一些參考和借鑒。1、一個孔中應接種多少個細胞?當使用標準96孔板時，貼壁細胞的zui小接種量至少為1,000個/孔(100μl培養(yǎng)基)。檢測白細胞時的靈敏度相對較低，因此推薦接種量不低于2,500個/孔(100μl培養(yǎng)基)。如果要使用24孔板或6孔板實驗，請先計算每孔相應的接種量，并按照每孔培養(yǎng)基總體積的10%加入CCK-8溶液。2、CCK8試劑盒日本同仁能否...
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2015-01-27
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GelRed核酸染料的產(chǎn)品特性
GelRed核酸染料產(chǎn)品特性：1.高靈敏度GelRed和GelGreen是目前市場中zui靈敏的凝膠核酸染料2.GelRed核酸染料更安全艾姆斯氏試驗結(jié)果表明，該染料的誘變性遠小于溴化乙錠(EB)3.穩(wěn)定性*可以使用微波爐加熱，可以在室溫下保存4.信噪比高樣品熒光信號強，背景信號低。5.GelRed核酸染料有廣泛的適應性適用于預制凝膠和凝膠電泳后染色6.染色過程簡單與EB一樣，在預制膠和電泳過程中不必擔心染料降解;而電泳后染色過程也只需30分鐘且無需脫色或沖洗，即可直接用紫外...
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2015-01-21
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脂質(zhì)體2000轉(zhuǎn)染DNA的操作過程
脂質(zhì)體2000適用于把DNA轉(zhuǎn)染入懸浮或貼壁培養(yǎng)細胞中，是目前條件下zui方便的轉(zhuǎn)染方法之一。轉(zhuǎn)染率高，優(yōu)于磷酸鈣法，比它高5~100倍，能把DNA和RNA轉(zhuǎn)染到各種細胞。用脂質(zhì)體2000進行轉(zhuǎn)染時，首先需優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件，應找出該批LR對轉(zhuǎn)染某一特定細胞適合的用量、作用時間等，對每批LR都要做：先要固定一個DNA的量和DNA/LR混合物與細胞相互作用的時間，DNA可從1~5μg和孵育時間6小時開始，按這兩個參數(shù)繪出相應LR需用量的曲線，再選用LR和DNA兩者*的劑量，確定出轉(zhuǎn)染...
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2015-01-13
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HyClone胎牛血清培養(yǎng)平滑肌細胞的兩種方法
HyClone胎牛血清培養(yǎng)血管平滑肌細胞常用的方法有貼塊法(explant)和酶解離法(enzymedisperse)。下面一起來看下這兩種方法。1、貼塊法方法：動物經(jīng)頸動脈放血后，在無菌操作下迅速取出胸腹主動脈段，置于含Hank's液的平皿中漂洗3次，將凝塊洗干凈后剝除外膜的纖維脂肪層，然后縱行切開血管，刮除內(nèi)膜即內(nèi)皮細胞迅速撕下中膜內(nèi)、中層，切成約1mm寬的小條，浸泡在含血清的Hank's液中，并將撕下小組織塊種植于培養(yǎng)瓶壁。置于37℃恒溫箱，2h左右，取出培養(yǎng)瓶加入20...
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2015-01-06
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纖維素酶的性質(zhì)及作用機理詳解
纖維素酶分子的大小因來源不同而不盡相同，三大類酶分子量一般在23Kda～146Kda之間。多數(shù)真菌和少數(shù)細菌的纖維素酶都受糖基化，糖基與蛋白之間以共價鍵結(jié)合，或呈可解離的絡合狀態(tài)。糖基化作用在一定程度上保護酶免受蛋白酶的水解，而纖維素酶正是由于糖基化，使其所含碳水化合物的比率在不同酶之間發(fā)生差異，導致酶的多形式和分子量的差別。通過比較分析，人們發(fā)現(xiàn)許多不同纖維素酶間表現(xiàn)出一定的同源性，且纖維素酶分子普遍具有類似的結(jié)構(gòu)。由球狀的催化結(jié)構(gòu)域(CD)、連接橋和纖維素結(jié)合結(jié)構(gòu)域(CB...
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2014-12-20
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