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新冠病毒核酸檢測(cè)濾光片原理是怎么樣的?

2020-03-26 15:04:24 NMOT

目前的新冠病毒核酸檢測(cè)試劑盒,多數(shù)釆用熒光定量PCR檢測(cè)法。檢測(cè)原理是用病毒獨(dú)特的基因序列委檢測(cè)靶標(biāo),通過(guò)PCR擴(kuò)增,然后我們的選擇這段靶標(biāo)DNA序列指數(shù)級(jí)增加,每一個(gè)擴(kuò)增出來(lái)的DNA序列,都可與我們預(yù)先加入的一段熒光標(biāo)記探針結(jié)合,產(chǎn)生特定的熒光信號(hào),擴(kuò)增出來(lái)的靶基因越多,累計(jì)的熒光信號(hào)就越強(qiáng)。然后PCR檢測(cè)儀里面的特殊波段的光學(xué)濾光片過(guò)濾掉噪音之后捕捉特定的新冠病毒熒光信號(hào),所以,新冠病毒核酸檢測(cè),其實(shí)就是通過(guò)生物PCR儀器檢測(cè)特定的光信號(hào)的累積來(lái)確定樣本中否存在新冠病毒核酸。


熒光定量PCR檢測(cè)法又稱(chēng) qPCR,隨著生命科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,qPCR技術(shù)已經(jīng)成為實(shí)驗(yàn)室最基礎(chǔ)的實(shí)驗(yàn)技術(shù)之一。熒光定量 PCR 熒光為基礎(chǔ)對(duì)核酸進(jìn)行定量分析,其應(yīng)用非常廣泛,qPCR(Real-time PCR、Real-time quantitative PCR、實(shí)時(shí)熒光定量) 技術(shù),是指在反應(yīng)體系中加入熒光染料,利用熒光信號(hào)積累,實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,最后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。qPCR以其特異性強(qiáng)、靈敏度高、重復(fù)性好、反應(yīng)速度快、定量準(zhǔn)確、全封閉反應(yīng)、自動(dòng)化程度高等特點(diǎn),成為國(guó)際公認(rèn)的核酸分子定量的標(biāo)準(zhǔn)方法,受到越來(lái)越多科研工作者的青睞。

新冠病毒SARS-CoV-2的檢測(cè)采用的是一種應(yīng)用非常廣泛的核酸檢測(cè)手段、被稱(chēng)為金標(biāo)準(zhǔn)的即時(shí)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(qPCR)。qPCR技術(shù)經(jīng)常被用來(lái)檢測(cè)HIV病毒、乙肝病毒等病原體。qPCR 的主要工作原理就是通過(guò)只對(duì)特定病毒有效的試劑制造大量的病毒核酸鏡像,從而檢測(cè)這種病毒是否出現(xiàn)在樣本,比如病人的鼻腔分泌物。核酸檢測(cè)的準(zhǔn)確率離不開(kāi)高質(zhì)量的試劑盒與其相互匹配的實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀儀器,

不是只有試劑盒就能進(jìn)行有效的核酸檢測(cè)了,而事實(shí)上新冠病毒核酸檢測(cè),必須依賴(lài)核酸檢測(cè)試劑和qPCR儀器設(shè)備的相互配合。打比方我們要想打印出一份文件,必須打印機(jī)本體(qPCR儀器)和墨盒(核酸檢測(cè)試劑盒)、打印紙張同時(shí)具備才可完成。


濾光片可適配熒光染料有:FAM、SYBR GreenⅠ;VIC、HEX、TET、JOE、TAMRA、CY3 ;ROX、Texas-Red;Cy5 、Quasar-670;Cy5.5、Quasar-705等


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